大賽璐手性柱是由具有光學(xué)活性的單體,固定在硅膠或其它聚合物上制成手性固定相,通過引入手性環(huán)境使對映異構(gòu)體間呈現(xiàn)物理特征的差異,從而達(dá)到光學(xué)異構(gòu)體拆分的目的。
要實現(xiàn)手性識別,手性化合物分子與手性固定相之間至少存在三種相互作用。這種相互作用包括氫鍵、偶級-偶級作用、π-π作用、靜電作用、疏水作用或空間作用。手性分離效果是多種相互作用共同作用的結(jié)果。這些相互作用通過影響包埋復(fù)合物的形成,特殊位點與分析物的鍵合等而改變手性分離結(jié)果。
在手性拆分中,溫度的影響是很顯著的。低溫增加手性識別能力,但可能引起色譜峰變寬而導(dǎo)致分離變差。因此確定手性分析方法過程中要考慮柱溫的影響,確定柱溫。
手性分析很關(guān)鍵的一項是流動相的選擇,手性分析一般都采用正相,使用多的流動相是正己烷、正庚烷、乙醇和異丙醇這四種,其中起洗脫作用的流動相是乙醇和異丙醇,正己烷和正庚烷用來調(diào)節(jié)流動相的洗脫強度。
正己烷和正庚烷對于樣品分離沒有什么太大的影響,不會改變選擇性和分離度,通常都可以混用,不過正庚烷比正己烷對人體的傷害要小很多,但價格是后者的一倍,所以歐美的很多大制藥公司多使用正庚烷,而國內(nèi)多使用正己烷。
流動相里添加酸或者堿以后,基本上不會提供額外的選擇性,但是卻能提高分離度,因為峰形好了,相同的保留時間兩個峰之間的分離度自然就好了。但是流動相里添加酸或者堿以后,會在柱子上殘留,即使長時間用中性流動相沖洗也不會有什么效果,這一點在鍵合相手性柱上表現(xiàn)的尤為明顯。