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反相c18色譜柱的正確運(yùn)用和維護(hù)須知,留意了

更新時(shí)間:2021-05-07瀏覽:1766次

   反相c18色譜柱柱效高、分離能力強(qiáng)、保留機(jī)理清楚,是液相色譜分離模式中使用最為廣泛的一種,對(duì)于生物大分子、蛋白質(zhì)及酶的分離分析,反相液相色譜正受到熱烈歡迎。

  在日常別離剖析工作中,反相c18色譜柱的正確運(yùn)用和維護(hù)十分重要,色譜柱運(yùn)用是否妥當(dāng),直接影響色譜柱的壽命,稍有不慎就會(huì)下降柱效、縮短運(yùn)用壽命甚至損壞。在色譜操作過(guò)程中,需求留意下列問(wèn)題,以維護(hù)色譜柱。
  (1)柱子在裝卸、替換時(shí),動(dòng)作要輕,接頭擰緊要適度。必須防止較強(qiáng)的機(jī)械振動(dòng),避免柱床產(chǎn)生空地。
  (2)假如儀器用來(lái)做慣例剖析,樣品種類有限,但剖析次數(shù)多,則不妨為每一類慣例剖析配置一根專用柱,這樣有助于延伸柱子的壽命。
  (3)避免壓力和溫度的急劇變化及任何機(jī)械轟動(dòng)。溫度的忽然變化或者使色譜柱從高處掉下都會(huì)影響柱內(nèi)的填充狀況;柱壓的忽然升高或下降也會(huì)沖動(dòng)柱內(nèi)填料,因此在調(diào)理流速時(shí)應(yīng)該緩慢進(jìn)行,在閥進(jìn)樣時(shí)閥的轉(zhuǎn)動(dòng)不能過(guò)緩。
  (4)應(yīng)逐
  漸改動(dòng)溶劑的組成,特別是反相色譜中,不該直接從有機(jī)溶劑改動(dòng)為全部是水,反之亦然。
  (5)如運(yùn)用柱溫操控設(shè)備時(shí),應(yīng)留意在通人活動(dòng)相后才干升溫。
  (6)一般說(shuō)來(lái)反相c18色譜柱不能反沖,只有生產(chǎn)者指明該柱能夠反沖時(shí),才能夠反沖除掉留在柱頭的雜質(zhì)。否則反沖會(huì)迅速下降柱效。
  (7)選擇運(yùn)用適合的活動(dòng)相,以避免固定相被破壞。有時(shí)能夠在進(jìn)樣器前面連接一個(gè)預(yù)柱,剖析柱是鍵合硅膠時(shí),預(yù)柱為硅膠,可使活動(dòng)相在進(jìn)入剖析柱之前預(yù)先被硅膠“飽滿”,避免剖析柱中的硅膠基質(zhì)被溶解。
  8)避免將基質(zhì)復(fù)雜的樣品尤其是生物樣品直接注人柱內(nèi),需求對(duì)樣品進(jìn)行預(yù)處理或者在進(jìn)樣器和反相c18色譜柱之間連接一個(gè)維護(hù)柱。維護(hù)柱一般是填有類似固定相的短柱。維護(hù)柱能夠并且應(yīng)該經(jīng)常替換。  

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